百科详情

　　电泳技术是分子生物学研究不可缺少的重要分析手段。电泳一般分为自由界面电泳和区带电泳两大类，自由界面电泳不需支持物，如等电聚焦电泳、等速电泳、密度梯度电泳及显微电泳等，这类电泳目前已很少使用。而区带电泳则需用各种类型的物质作为支持物，常用的支持物有滤纸、醋酸纤维薄膜、非凝胶性支持物、凝胶性支持物及硅胶-G薄层等，分子生物学领域中最常用的是琼脂糖凝胶电泳。所谓电泳，是指带电粒子在电场中的运动，不同物质由于所带电荷及分子量的不同，因此在电场中运动速度不同，根据这一特征，应用电泳法便可以对不同物质进行定性或定量分析，或将一定混合物进行组份分析或单个组份提取制备，这在临床检验或实验研究中具有极其重要的意义。电泳仪正是基于上述原理设计制造的。下面简单介绍其使用方法及注意事项。　　

　　1.首先用导线将电泳槽的两个电极与电泳仪的直流输出端联接，注意极性不要接反。

　　2.电泳仪电源开关调至关的位置，电压旋钮转到最小，根据工作需要选择稳压稳流方式及电压电流范围。

　　3.接通电源，缓缓旋转电压调节钮直到达到的所需电压为止，设定电泳终止时间，此时电泳即开始进行。

　　4.工作完毕后，应将各旋钮、开关旋至零位或关闭状态，并拨出电泳插头。　　

　　1.电泳仪通电进入工作状态后，禁止人体接触电极、电泳物及其它可能带电部分，也不能到电泳槽内取放东西，如需要应先断电，以免触电。同时要求仪器必须有良好接地端，以防漏电。

　　2.仪器通电后，不要临时增加或拨除输出导线插头，以防短路现象发生，虽然仪器内部附设有保险丝，但短路现象仍有可能导致仪器损坏。

　　3.由于不同介质支持物的电阻值不同，电泳时所通过的电流量也不同，其泳动速度及泳至终点所需时间也不同，故不同介质支持物的电泳不要同时在同一电泳仪上进行。

　　4.在总电流不超过仪器额定电流时（最大电流范围），可以多槽关联使用，但要注意不能超载，否则容易影响仪器寿命。

　　5.某些特殊情况下需检查仪器电泳输入情况时，允许在稳压状态下空载开机，但在稳流状态下必须先接好负载再开机，否则电压表指针将大幅度跳动，容易造成不必要的人为机器损坏。

　　6.使用过程中发现异常现象，如较大噪音、放电或异常气味，须立即切断电源，进行检修，以免发生意外事故。

　　一、电泳仪的输出达不到设定值

　　电泳仪的输出值状态遵“循欧姆定律”：电压U=电流I×(电泳槽)电阻R

　　电阻R相对不变的情况下，U、I、P(功率P=电流I×电压U)中任意1个参数恒定，其他参数也随之恒定;而任意1个参数变化，其他参数也随之正比变化。

　　如果电泳仪的输出电压U达不到预置值，应首先观察I或P是否已经恒定，或者已经达到电泳仪所规定的最大I或P(JY电泳仪均有明确指示灯标志)。如果尚未达到极限值，将已经恒定I或P的设置调大(有必要的话至极限值)，才能够提高电压输出。

　　如果电泳仪的电流I达不到预置值，可调整电压U或功率P。如果电泳仪的功率P达不到预置值，可调整电压U或电流I。

　　二、电脑控制电泳仪过压报警

　　(1)检查是否空载使用。

　　(2)是否电泳槽未加缓冲液。

　　(3)是否电泳槽铂金丝断。

　　三、过流保护

　　(1)是否存在电泳槽短路现象。

　　(2)缓冲液是否选错。

　　四、漏电保护

　　(1)是否有液体溅入仪器内部或输出接口上。

　　(2)是否有很多灰尘落入仪器内部。

电泳仪　　1937年，瑞典生化学家Tiselius集前人百余年探索电泳现象之大成，发明了Tiselius电泳仪，在此基础上建立了研究蛋白质的自由界面电泳方法，利用该法首次证明人血清是由白蛋白（A）、α、β、γ球蛋白组成，并因此于1948年获得阿果奖。随后电泳技术的发展突飞猛进，1949年，RicketlsMarrack等人证明人血清蛋白质经电泳分离可依次分为白蛋白，α1、α2、β、γ球蛋白五个组分，1957年Reiner对人血清五个组分蛋白进行了定量分析。

　　但自由界面电泳没有固定支持介质，扩散和对流作用较强，影响分离效果，于是在50年代相继出现了固相支持介质电泳。最初的支持介质是滤纸和醋酸纤维素膜，目前这些介质在实验室已经应用较少。在很长一段时间里，小分子物质如氨基酸、多肽、糖等通常用滤纸、纤维素或硅胶薄层平板作为介质进行电泳分离、分析，但目前一般使用灵敏度更高的技术如高效液相色谱法(HPLC)等来进行分析。而对于复杂的生物大分子，以滤纸、硅胶或醋酸纤维素膜等作为支持介质进行电泳，其分离效果并不理想。于是1959年，Raymond和Weintraub,Davis和Ornstein先后利用人工合成凝胶作支持介质建立了聚丙烯酰胺凝胶电泳，从而大大提高了电泳的分辨率和分离效果，增强了电泳技术的发展、渗透及与其他技术结合配套的能力。致使各式各样的电泳技术和电泳材料如雨后春笋、竞相争荣，成为当代实验科学技术中品种繁多、应用广泛、基础与尖端技术皆备的大技术。

　　根据电泳中是否使用支持介质分为自由电泳和区带电泳。

　　自由电泳不使用支持介质，电泳在溶液中进行。这类电泳又分为非自由界面电泳和自由界面电泳两类。非自由界面电泳指悬浮在溶液中的带电粒子（如各种细胞）通电后全部移动，不出现界面，如显微电泳等。自由界面电泳中被分离物质集中在某一层，形成各自的界面而进行定性或定量分析。自由界面电泳需要昂贵精密的电流仪器，仅在少数特殊电泳如等电聚焦电泳和等速电泳中使用。

　　区带电泳都使用支持介质，根据支持介质不同分为滤纸电泳、醋纤膜电泳、薄层电泳和凝胶电泳等。此外，根据支持介质的装置形式不同又可分为水平板式电泳、垂直板式电泳、垂直盘状电泳、毛细管电脉、桥形电泳和连续流动电泳等。